如何通過BLS電融合儀以及配件聚集創建胚胎
日期：2025-05-10 06:20
瀏覽次數：3427
摘要：
注射器內吸入培養基，在35mm組織培養板上微滴（大致直徑3mm）點樣成若干行（列）。向培養板內小心注入石蠟油使其覆蓋整板，注意不要使石蠟油直接傾倒在微滴上。石蠟油很容易越過這些微滴。石蠟油的量要能完全覆蓋這些微滴。
使用配件按照說明操作,制作凹陷。
37度, 5% CO2條件下孵育培養板幾個小時，目的是讓培養基在液滴內達到平衡。這一步可以在形成凹陷的步驟之前進行。
實驗前準備好待聚集的細胞、組織或胚胎，不要將它們長時間暴露在室溫下或脫離*適培養條件時間過長。通過在組織培養板蓋上加入幾滴M2培養基和Tyrode’s 酸溶液來去除卵透明帶。將組織培養板的培養區域表面如此處理后，胚胎將本能的黏附在表面——因此我們需要使用蓋。確認所有培養基溶液和酸液都接近室溫。將胚胎放置在一滴M2培養基上。取盡可能少的內含10-20個胚胎的培養基，并移到一滴酸液上。重復這個步驟并將胚胎移到新的一滴酸液上。讓胚胎在吸頭內保持上下移動，觀察卵透明帶是如何溶解的。迅速將胚胎移入M2培養基。用幾滴培養基溶液洗滌并移入剛才制成的凹陷中。